اثر هم افزایی پروتئین oprf از pseudomonas aeruginosa و ادجوانت ltb در ایمنی زایی

پایان نامه
چکیده

pseudomonas aeruginosa عامل عفونت های مختلفی مانند عفونت های مجاری ادراری، عفونت های مربوط به زخم و سوختگی، عفونت های قرنیه چشم و مجاری تنفسی تحتانی می باشد. پروتئین oprf در باکتری p. aeruginosa یک پروتئین سطحی بزرگ غشا خارجی می باشد که ازلحاظ خاصیت آنتی ژنی در بین سویه های مختلف حفظ شده است و می تواند به عنوان یک کاندید واکسن امیدبخش باشد. همچنین این موضوع به خوبی اثبات شده است که ltb یک تعدیل کننده ایمنی قدرتمند با فعالیت ادجوانتی قوی می باشد. هدف اصلی مطالعه اخیر ارزیابی ایمنی زایی پروتئین oprf ترکیب شده با ltb به عنوان یک کاندید واکسن علیه p. aeruginosa می باشد. در ابتدا پروتئین oprf بدون ltb و پروتئین کایمر oprf-ltb در وکتور pet28a(+) همسانه سازی شد. سپس پلاسمید های dna نوترکیب به سلول مستعد e. coli bl21(de3) به عنوان میزبان بیانی انتقال یافت. پروتئین ها بیان شده و سپس استخراج شده و با روش sds-page آنالیز شدند. سپس از طریق کروماتوگرافی میل ترکیبی با کمک ستون ni-nta تخلیص شد و پروتئین ها با روش western blotting تائید شدند. سپس موش های balb/cبا استفاده از پروتئین های oprf و پروتئین کایمر oprf-ltb ایمن شدند و آزمایش الایزا انجام شد.ltb توانست ایمنی زایی oprf را افزایش داد. سپس به منظور ارزیابی ایمنی زایی و حفاظت بخشی این پروتئین ها موش های ایمن شده را سوزانده و با p. aeruginosa مورد چالش قراردادیم. موش های ایمن شده با پروتئین کایمر oprf-ltb ایمنی و حفاظت بخشی بیشتری نسبت به موش های ایمن شده با پروتئین oprf بدون ltb از خود نشان دادند بطوری که درصد زنده مانی موش های ایمن با پروتئین های oprf و oprf-ltb به ترتیب 50% و75% نشان داده شد وهیچ یک از موش های غیر ایمن زنده نماندند (p<0.001).همچنین پس از تشریح موش های ایمن با پروتئین های oprf و oprf-ltb و غیر ایمن کاهش در تعداد باکتری ها در کبد وطحال این موش ها نسبت به موش های غیر ایمن مشاهده شد (p<0.001) .علاوه بر این ایمنی زایی غیرفعال (passive) توانست باعث خنثی سازی بیماری زایی این یاکتری شود. بطوریکه این نتایج اثبات می کند که قابلیت oprf-ltb می تواند به عنوان یک کاندید واکسن برای مقابله با عفونتهای p. aeruginosa پیشنهاد شود.

منابع مشابه

Conserved OprF as a Selective Immunogen Against Pseudomonas aeruginosa

Background & Objectives: Due to the importance of Pseudomonas aeruginosa in severe inpatient infections and high mortality, the need for an efficient vaccine against these bacteria is increasing. In this regard, the general outer membrane porin of the most problematic microorganism P. aeruginosa, outer membrane protein F (OprF), is a good vaccine cand...

متن کامل

Linker-insertion mutagenesis of Pseudomonas aeruginosa outer membrane protein OprF.

The oprF gene, expressing Pseudomonas aeruginosa major outer membrane protein OprF, was subjected to semi-random linker mutagenesis by insertion of a 1.3 kb Hincll kanamycin-resistance fragment from plasmid pUC4KAPA into multiple blunt-ended restriction sites in the oprF gene. The kanamycin-resistance gene was then removed by Pstl digestion, which left a 12 nucleotide pair linker residue. Nine ...

متن کامل

Conserved OprF as a Selective Immunogen against Pseudomonas aeruginosa

Background & Objectives Due to the importance of Pseudomonas aeruginosa in severe inpatient infections and high mortality, the need for an efficient vaccine against these bacteria is increasing. In this regard, the general outer membrane porin of the most problematic microorganism P. aeruginosa, outer membrane protein F (OprF), is a good vaccine candidate. Methods The databank of NCBI was use...

متن کامل

مقایسه اثر ایمنی زایی نمک‌های آلومینیوم به عنوان ادجوانت در فرمولاسیون واکسن هپاتیت- ب نوترکیب

Background: Aluminum salts are common adjuvants in human and animal vaccine preparations. The two adjuvants aluminum phosphate and aluminum hydroxide show acceptable immunoadjuvant properties with many antigens. These two salts have different physicochemical characteristics that make each one suitable for certain antigens. The surface antigen of Hepatitis B (HBsAg) has several antigenic epitope...

متن کامل

مطالعه اثر ادجوانت HSP90 بر ایمنی زایی HbsAg در موش بالب‌سی

Abstract Background: Heat shock proteins, (Hsps) are used as adjuvants in vaccines these proteins induce the inflammatory cytokines and the maturation of monocyte MQ to dendritic cells. This study was done to determine the effect of Hsp90 on the immunogenicity of HbSAg in BalbC mice. Materials and methods: In this experimental study we injected Hsp90 β subunit together with HbsAg to 30 balbC mi...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023